Table des matières
- 1 Pourquoi Utilise-t-on la trypsine en culture cellulaire?
- 2 Comment fonctionne la trypsine?
- 3 Quel est l’intérêt des acides aminés dans un milieu de culture cellulaire?
- 4 Pourquoi saturer avec BSA?
- 5 Comment sont libérées les cellules mononucléaires?
- 6 Comment se développent les cellules pendant la culture?
Pourquoi Utilise-t-on la trypsine en culture cellulaire?
La trypsine est une enzyme permettant la rupture des liaisons entre les cellules et le support de culture lors des passages. La présence d’EDTA dans la solution de trypsine augmente son efficacité en isolant les ions Calcium et Magnésium.
Comment fonctionne la trypsine?
La trypsine (EC 3.4.21.4) est une peptidase du suc pancréatique participant à la digestion des protéines. Il s’agit d’une protéase à sérine qui hydrolyse les liaisons peptidiques situées côté C d’un résidu de lysine ou d’arginine, qui sont des acides aminés basiques.
Pourquoi on pratique la culture cellulaire?
La culture cellulaire est un ensemble de techniques de biologie utilisées pour faire croître des cellules hors de leur organisme (ex-vivo) ou de leur milieu d’origine, dans un but d’expérimentation scientifique ou de fécondation in vitro.
Quel est l’intérêt des acides aminés dans un milieu de culture cellulaire?
La glutamine (Gln) est indispensable à quasiment toutes les cultures de cellule de mammifères, cet acide aminé essentiel est la source majeure d’énergie pour la prolifération cellulaire. Une carence en glutamine peut conduire à un arrêt de la croissance cellulaire dû à une inhibition de la synthèse de l’ADN.
Pourquoi saturer avec BSA?
Cela permet des dosages optimaux avec une forte densité d’anticorps de capture ou de molécules de capture sur les surfaces. En conséquence de cette optimisation des surfaces, de nombreuses autres protéines ou peptides et d’autres molécules de l’échantillon peuvent également se fixer à la surface.
Quel est l’enzyme la plus utilisée en culture cellulaire?
Il s’agit de l’enzyme la plus largement utilisée en culture cellulaire pour libérer les cellules adhérentes des surfaces des récipients de culture. La trypsine est facilement tolérée par la plupart des types de cellules cultivées en culture.
Comment sont libérées les cellules mononucléaires?
Les cellules mononucléaires peuvent être libérées des tissus mous par hydrolyse enzymatique avec des enzymes telles que la collagénase, la trypsine ou la pronase, qui dégradent la matrice extracellulaire. En variante, des morceaux de tissu peuvent être placés dans un milieu de croissance, et les cellules en croissance conviennent pour la culture.
Comment se développent les cellules pendant la culture?
Puisque les cellules sont habituellement en division continue pendant la culture, il est normal qu’elles se développent pour occuper toute la surface ou tout le volume disponible. Cela peut générer plusieurs problèmes: L’épuisement des éléments nutritifs de l’environnement. L’ accumulation de cellules apoptotiques ou nécrotiques.